[发明专利]一种提高免疫检测灵敏度的方法

权利要求书

1.一种生物素-亲和素的复合物，其特征在于，所述复合物包括：

(a)固相载体；

(b)根序列，所述的根序列是固定于所述固相载体表面上的寡核苷酸单链；

(c)引发序列，所述的引发序列是互补结合于所述根序列的、并且在一端标记有生物素的寡核苷酸单链；

(d)第n级亲和素，其中n为1-20的正整数；并且当n为1时，则第1级亲和素结合于所述引发序列上的生物素；和

(e)生长序列，所述的生长序列是两端标记有生物素的寡核苷酸单链，所述生长序列中位于一端的生物素与第n级亲和素结合，而位于另一端的生物素与第n+1级亲和素结合或处于未结合状态，其中n为1-20的正整数。

2.如权利要求1所述的复合物，其特征在于，所述的固相载体是微球，更佳地为磁性微球。

3.如权利要求1所述的复合物，其特征在于，n  为1，2，3，4，5，6，7，8，9，10，11，12，13，14，15，16，17，18，或19。

4.如权利要求1所述的复合物，其特征在于，所述的根序列的长度为20-60个碱基，更佳地为25-50个碱基。

5.如权利要求1所述的复合物，其特征在于，所述的引发序列的长度为10-50个碱基，更佳地为15-40个碱基。

6.如权利要求1所述的复合物，其特征在于，所述的生长序列的长度为8-30个碱基，更佳地为10-20个碱基。

7.一种生物素-亲和素的复合物，其特征在于，所述复合物包括：

(i)引发序列，所述的引发序列是在一端标记有生物素的寡核苷酸单链；

(ii)第n级亲和素，其中n为1-20的正整数；并且当n为1时，则第1级亲和素结合于所述引发序列上的生物素；和

(iii)生长序列，所述的生长序列是两端标记有生物素的寡核苷酸单链，所述生长序列中位于一端的生物素与第n级亲和素结合，而位于另一端的生物素与第n+1级亲和素结合或处于未结合状态，其中n为1-20的正整数。

8.一种免疫检测分析方法，其特征在于，在权利要求1或7所述的生物素-亲和素的复合物存在下进行免疫分析检测。

9.一种权利要求1或7所述的生物素-亲和素的复合物的用途，其特征在于，用于制备提高免疫检测灵敏度的灵敏度增强剂。

10.一种制备的生物素-亲和素的复合物的方法，包括步骤：

(a)将用作根序列的第一寡核苷酸单链固定于固相载体，

(b)将用作引发序列的第二寡核苷酸单链与所述根序列接触，所述的第二寡核苷酸单链是在一端标记有生物素的寡核苷酸单链，从而形成相对稳定的“根序列-引发序列”杂合体，其中所述的引发序列互补结合于所述的根序列；随后去除过量的引发序列；

(c)将亲和素与所述引发序列上的生物素接触并结合；随后去除过量的、未结合的亲和素，从而获得第1级生物素-亲和素的复合物；

或者所述步骤(c)还包括重复以下步骤(c1)-(c2)共1至n-1次，从而获得第n级生物素-亲和素的复合物，其中，n为2-20的正整数：

(c1)将用作生长序列的第三寡核苷酸单链与上一步骤获得的生物素-亲和素的复合物接触，其中所述第三寡核苷酸单链是两端标记有生物素的寡核苷酸单链，从而使得所述生长序列中位于一端的生物素与上一步骤中形成的结合状态的亲和素形成结合；随后去除过量的、未结合的生长序列；

(c2)将亲和素与步骤(c1)中所述生长序列另一端的生物素接触并结合；随后去除过量的、未结合的亲和素。