[发明专利]硫酸铵梯度法－薄膜蒸发法制备盐酸小檗碱长循环脂质体的方法

权利要求书

1.一种硫酸铵梯度法-薄膜蒸发法制备盐酸小檗碱长循环脂质体的方法，步骤如下：

1).将蛋黄卵磷脂，以及1/3蛋黄卵磷脂质量的胆固醇，以及1/20-1/5蛋黄卵磷脂质量的聚乙二醇2000溶于适量无水乙醇中，形成黄色透亮溶液；

2).减压回收乙醇，在容器壁形成膜；注入硫酸铵溶液，使得膜材溶解；水化1h～2h；

3).以蒸馏水为透析介质，透析15～20h，制造硫酸铵梯度，得空白脂质体；

4).在空白脂质体中加入盐酸小檗碱溶液；

5).在30℃～60℃孵化10～60分钟；

6).取孵化后的溶液，以蒸馏水为透析外液，在4℃～37℃温度下透析12h，透析到外液无色透明；把透析液转移至容量瓶中定容，即可获得包封率高，稳定，粒径均匀的长循环脂质体。

2.按照权利要求1所述的硫酸铵梯度法-薄膜蒸发法制备盐酸小檗碱长循环脂质体的方法，其特征在于，

所述的孵化温度和时间为：60℃下孵化10分钟；

所述的硫酸铵溶液的浓度分别是1.0ml.l^-1～2.5ml.l^-1；硫酸铵溶液的加入量为25ml硫酸铵溶液/50～500mg EPC；

所述的透析温度为4℃。

3.按照权利要求1或2或3所述的硫酸铵梯度法-薄膜蒸发法制备盐酸小檗碱长循环脂质体的方法，其特征在于，具体操作步骤是：

1).用50ml三角烧瓶称取50～500mg蛋黄卵磷脂，以及1/3蛋黄卵磷脂量的胆固醇，以及1/20-1/5蛋黄卵磷脂质量的聚乙二醇2000溶于适量乙醇中，若难溶，可加热和超声波处理使其溶解，形成黄色透亮溶液；

2).在旋转蒸发仪减压回收乙醇，直至无醇味，在烧瓶壁形成膜，注入25ml 2.5ml·l^-1的硫酸铵溶液，适当超声，使得膜材溶解，水化1h～2h；

3).把溶液装入透析袋，以蒸馏水为透析介质，透析15～20h制造硫酸铵梯度，最后得空白脂质体；

4).取5ml的空白脂质体将其转移至50ml三角烧瓶中，加入5ml的1mg·l^-1-2mg·l^-1的盐酸小檗碱溶液；

5).在60℃孵化10分钟；

6).取1～2ml转移至透析袋中，以蒸馏水为透析外液，于4℃下透析12h，每3h换一次透析液，需直至透析到外液无色透明，把透析液转移至100ml容量瓶中定容，测紫外吸光度，根据标准曲线算出包封率。