[发明专利]DNA碱基序列的测序方法及用于该方法的样品调制方法

摘要

本发明涉及利用由酶进行的DNA互补链合成的DNA分析方法，用于高效率的DNA碱基序列测序方法的样品的调制方法以及用于该方法的试剂盒。

主权项

1.碱基序列测序方法，其特征在于包括以下工序：(1)将样品DNA利用限制性内切酶切断得到DNA片段的工序及(2)在DNA片段的3’末端上导入具有特定碱基序列的寡核苷酸的工序及(3)将导入了上述寡核苷酸的上述DNA的片段的1条链作为模板，使用由与寡核苷酸的碱基序列的至少一部分至补的第1碱基序列部分及与利用上述限制性内切酶识别的碱基序列互补的第2碱基序列部分及、从1个碱基至4个碱基的范围的碱基组合而形成的第3碱基序列部分组成的，并被标记的标记引物，进行互补链合成延伸反应，得到具有与DNA片段的1条链互补的碱基序列的标记延伸引物的工序及(4)使(a)将上述导入了寡核苷酸的上述DNA片段的1条链作为模板，使用上述标记引物进行序列反应的工序及、(b)将具有上述DNA片段的1条链的碱基序列及与其邻接的碱基序列的样品DNA的1条链的一部分或样品DNA的1条链作为模板，使用上述标记延伸引物进行序列反应的工序，分别或同时进行的工序及、(5)将上述序列反应的生成物进行电泳，确定上述DNA片段的碱基序列及、与DNA片段的碱基序列邻接的样品DNA的至少一部分的碱基序列工序。