[发明专利]鲎试剂的活性定向生产工艺

摘要

一种鲎试剂的活性定向生产工艺，用抗凝剂、洗涤剂、破解剂、增敏剂、至敏保护剂，通过两次离心分离，使鲎血细胞壁不易萎缩变性呈块，易于破解，增强凝固蛋白酶的活性，制得鲎试剂不易受污染，灵敏度高，自身空白阴性观察时间长，产品稳定性高。本发明保护了鲎资源，避免了盲目生产造成产品的积压和浪费，提高企业经济效益。

主权项

1、一种鲎试剂的活性定向生产工艺，用抗凝剂、洗涤剂、破解剂、增敏剂、至敏保护剂对鲎血进行处理，通过两次离心分离，其特征在于生产工艺如下：A、将新鲜活鲎洗净，用75％的乙醇消毒，心门采血，加入抗凝剂浓度为0.025M茶碱溶液体积比为1∶4.5，在10℃制鲎血；B、在750-800转/分的速度下将鲎血离心分离，弃蓝色血清，将余下的白色细胞按体积比1∶4加入助悬洗涤剂浓度为0.5M的NaCl溶液，处理后，加入0.03M的tris-HCl溶液的细胞破解剂，至使血细胞完全破解，在0℃下存放获得细胞内溶物：C、加入体积比为1∶0.6的CHCl3，在2-5℃下振摇，在2500转/分的速度下离心分离，收集细胞内溶物即鲎试剂原液，加入增敏剂使NaCl浓度为0.5M，CaCl20.31M的混合液7％(g/v)，并预检，再加入至敏保护剂，每毫升含(1-3)-β-Glucn(真菌多糖)100rg浓度即可分装，提高鲎试剂与细菌内毒素特异性反应，在零下45℃-55℃冻干，在35℃以下封口制成品。