[发明专利]用于温和检测5-羟甲基胞嘧啶的试剂盒及其检测方法在审

专利信息
申请号: 202211440540.2 申请日: 2022-11-17
公开(公告)号: CN115961003A 公开(公告)日: 2023-04-14
发明(设计)人: 张臻昊;祁艳;戴雨轩;劳可静;陈鹏;苟兴春 申请(专利权)人: 西安医学院
主分类号: C12Q1/6858 分类号: C12Q1/6858;C12Q1/6886;C12Q1/6883;C12N15/11
代理公司: 北京细软智谷知识产权代理有限责任公司 11471 代理人: 刘静荣
地址: 710000 *** 国省代码: 陕西;61
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摘要: 发明涉及一种用于温和检测5hmC的试剂盒及其检测方法,所述试剂盒包括:封闭反应液、APOBEC脱氨基转化液、吡啶硼烷转化液、连接反应液和扩增反应液;所述连接反应液包括探针A和探针B。本发明首先应用葡糖转移酶将二磷酸尿苷‑葡萄糖(UDP‑Glu)修饰在5hmC的羟基上形成5gmc,保护5hmC不被后续反应影响,之后应用APOBEC对C和5mC进行脱氨基转化为尿嘧啶(U),再通过吡啶硼烷将5fC和5caC转化为二氢尿嘧啶(DHU),U与DHU与A碱基互补配对,而5gmc依然与G配对,从而5hmC与其他碱基形成单碱基差异。采用基于连接的环介导等温扩增(LAMP)高灵敏检测5hmC。本发明的检测方法温和高效,能检测低至2fM的5hmC,特异性达到1%。
搜索关键词: 用于 温和 检测 甲基 胞嘧啶 试剂盒 及其 方法
【主权项】:
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