[发明专利]一种构建高效生物合成维生素K2

摘要

本发明涉及遗传工程技术领域，具体涉及一种构建高效生物合成维生素K2工程菌的方法，包括如下步骤：步骤一、构建得到△pbuE菌株EC1；步骤二、以菌株EC1全基因组为模板，用PdegQ启动子序列替换枯草芽孢杆菌法呢基二磷酸合酶基因ispA的原始启动子，得到菌株EC2；步骤三、以菌株EC2全基因组为模板，敲除1‑脱氧木酮糖‑5‑磷酸合酶基因dxs，得到菌株EC3；步骤四、以克雷伯氏菌全基因组为模板，扩增得到dxs基因，通过与pHY‑P43载体连接转化至菌株EC3中，得到EC4。本发明通过启动子替换和关键基因优选构建高产MK‑7的枯草芽孢杆菌，最终菌株EC4的MK‑7产量较原始菌株提高了5.42倍。