[发明专利]一种制备双链RNA的方法在审
申请号: | 202210849128.X | 申请日: | 2022-07-19 |
公开(公告)号: | CN115807048A | 公开(公告)日: | 2023-03-17 |
发明(设计)人: | 梁兴国;陈辉;安然 | 申请(专利权)人: | 中国海洋大学 |
主分类号: | C12P19/34 | 分类号: | C12P19/34;C12Q1/6844 |
代理公司: | 青岛中天汇智知识产权代理有限公司 37241 | 代理人: | 韩丽萍 |
地址: | 266000 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明属于核酸技术领域,为解决现有方法中RNA与转录模板过多结合导致聚合酶的聚合反应受阻、核糖核酸酶H与转录模板的结合影响聚合酶延伸速率的问题,本发明提供一种制备双链RNA的方法。首先,针对要制备的双链RNA,设计含有错配且序列完全对称的泡状结构的环状双链DNA模板;然后设计短链DNA作为辅助链;接着,在体系中同时加入环状双链DNA模板、RNA聚合酶、RNase H、辅助链、NTPs、RNA酶抑制剂、无机焦磷酸酶进行转录。转录出的RNA与泡状结构处的单链DNA结合非常弱,降低了对RNA聚合酶的聚合反应的阻碍;RNase H的酶切位点不在环状双链DNA模板的泡状结构处,避免了对聚合酶延伸的影响。 | ||
搜索关键词: | 一种 制备 rna 方法 | ||
【主权项】:
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