[发明专利]一种制备双链RNA的方法在审

专利信息
申请号: 202210849128.X 申请日: 2022-07-19
公开(公告)号: CN115807048A 公开(公告)日: 2023-03-17
发明(设计)人: 梁兴国;陈辉;安然 申请(专利权)人: 中国海洋大学
主分类号: C12P19/34 分类号: C12P19/34;C12Q1/6844
代理公司: 青岛中天汇智知识产权代理有限公司 37241 代理人: 韩丽萍
地址: 266000 山*** 国省代码: 山东;37
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摘要: 发明属于核酸技术领域,为解决现有方法中RNA与转录模板过多结合导致聚合酶的聚合反应受阻、核糖核酸酶H与转录模板的结合影响聚合酶延伸速率的问题,本发明提供一种制备双链RNA的方法。首先,针对要制备的双链RNA,设计含有错配且序列完全对称的泡状结构的环状双链DNA模板;然后设计短链DNA作为辅助链;接着,在体系中同时加入环状双链DNA模板、RNA聚合酶、RNase H、辅助链、NTPs、RNA酶抑制剂、无机焦磷酸酶进行转录。转录出的RNA与泡状结构处的单链DNA结合非常弱,降低了对RNA聚合酶的聚合反应的阻碍;RNase H的酶切位点不在环状双链DNA模板的泡状结构处,避免了对聚合酶延伸的影响。
搜索关键词: 一种 制备 rna 方法
【主权项】:
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