[发明专利]一种利用酚氯仿法纯化RNA的方法在审
申请号: | 202210569028.1 | 申请日: | 2022-05-24 |
公开(公告)号: | CN114891782A | 公开(公告)日: | 2022-08-12 |
发明(设计)人: | 贺力;王宁;李恒宽;王梽名;张林珍;熊筱萱 | 申请(专利权)人: | 四川农业大学 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 重庆信必达知识产权代理有限公司 50286 | 代理人: | 李小伟 |
地址: | 625000 四*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | 本发明属于基因工程技术领域,公开了一种利用酚氯仿法纯化RNA的方法,通过酚氯仿法优化实验步骤,通过变性作用抑制RNaseA和DNaseI活性,除去RNaseA和DNaseI后获得纯化的RNA双链。具体包括:利用Trizol试剂提取总RNA;添加DNaseI试剂去除基因组DNA;在反应体系中加入RNaseA去除单链RNA;利用酚氯仿法纯化dsRNA;对dsRNA进行反转录反应;设计特异性引物并进行PCR扩增;琼脂糖凝胶电泳。本发明通过酚氯仿法优化实验步骤,通过变性作用抑制RNaseA和DNaseI活性,避免反转录和RT‑PCR过程中RNA降解、cDNA/DNA产物降解的影响。 | ||
搜索关键词: | 一种 利用 氯仿 纯化 rna 方法 | ||
【主权项】:
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