[发明专利]一种利用TaqMan探针和特异性引物鉴别山银花及其制剂的方法

摘要

本发明属于分子生物学技术领域，尤其涉及一种利用TaqMan探针和特异性引物鉴别山银花及其制剂的方法。所述特异性引物包括上游引物和下游引物，上游引物的核苷酸序列为5'‑TCCAACAGTTTTTCTTTTATTTTTA‑3'，下游引物的核苷酸序列为5'‑GTCTTAGTGTATACGAGTTAAAAAA‑3；TaqMan探针的核苷酸序列为5'FAM‑TAAAAAATGAAAGCCCAAAACACAA‑BQ13'。TaqMan探针法是首次应用到山银花的鉴别；专属性强，从物种DNA层面鉴别山银花，本发明所述引物及探针序列是山银花所专有，其他物种或药材则无此序列；灵敏度高，只要ng级别的模板DNA浓度，当药材、饮片及制剂中掺入1％的山银花药材或粉末即可检出；适用性广，不受药材生长环境及外观性状的影响，性状完全破碎的药材粉末均可应用，对于山银花制剂中可检查山银花原料药材基源是否正确，即使经过加工炮制的山银花制剂也适用。