[发明专利]一种harzianic acid高产木霉菌株的构建方法有效
| 申请号： | 202210449442.9 | 申请日： | 2022-04-27 |
| 公开（公告）号： | CN114806901B | 公开（公告）日： | 2023-09-08 |
| 发明（设计）人： | 庞冠;蔡枫;沈其荣 | 申请（专利权）人： | 南京农业大学 |
| 主分类号： | C12N1/15 | 分类号： | C12N1/15;C12N15/80;C12N15/54;C12N15/113;C12P17/10;C12R1/885 |
| 代理公司： | 南京天华专利代理有限责任公司 32218 | 代理人： | 吴爽;徐冬涛 |
| 地址： | 210095 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种harzianic acid高产木霉菌株的构建方法，（1）以野生型木霉菌株基因组DNA为模板进行PCR扩增，获取hacI编码序列上游片段和hacI编码区部分片段，分别命名为UF和DF；（2）以质粒pUC19‑hph‑Ptef1为模板进行PCR扩增，获取包含潮霉素B磷酸转移酶元件hph和里氏木霉QM6a中tef1基因启动子序列的片段Ptef1，命名为hph‑Ptef1；（3）利用重叠PCR方法将上述3个片段按以下顺序连接，UF、hph‑Ptef1、DF获得超表达元件，命名为UF‑hph‑Ptef1‑DF；（4）将步骤（3）中超表达元件转入木霉菌的原生质体中，经潮霉素B筛选、PCR验证和HPLC检测后，获得高产harzianic acid的木霉菌株OEhacI。本发明的方法构建的harzianic acid高产菌株，在发酵4天即可在常规培养基PDB中摇瓶产生大量harzianic acid，从而为规模化生产harzianic acid提供有效开发技术和相应工程生产菌。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 harzianic acid 高产 霉菌 构建 方法 | ||
【主权项】：
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