[发明专利]一种重组Fiber2蛋白、其制备方法与应用

摘要

本发明公开了一种重组Fiber2蛋白、其制备方法与应用。该蛋白的编码序列如SEQIDNO.1所示，用于制备重组Fiber2蛋白，步骤为：通过密码子优化合成Fiber2基因，在Fiber2的N端融合杜氏藻碳酸酐酶N‑半结构域的前11个氨基酸残基(VSEPHDYNYEK)和His6，利用基因装配方法，构建了pET23a‑rFiber2重组表达质粒，将重组载体转化到大肠杆菌Rosetta(DE3)中行表达，通过Ni‑NTA亲和纯化，得到重组Fiber2蛋白。本发明显著提高了重组Fiber2蛋白在大肠杆菌中的表达量和可溶性，且改进了蛋白纯化流程，减少了重组Fiber2蛋白的内毒素含量，可实现重组Fiber2蛋白的大规模发酵和生产；WesternBlot和动物实验表明重组Fiber2蛋白具备良好的免疫原性和免疫保护力，可用于制备低成本、质量可控、安全有效、能够预防高致病性FAdV‑4病毒感染的亚单位疫苗。