[发明专利]一种采用少量简并引物全面扩增humanTCRβ链文库的制备方法在审
| 申请号： | 202111522460.7 | 申请日： | 2021-12-13 |
| 公开（公告）号： | CN114107287A | 公开（公告）日： | 2022-03-01 |
| 发明（设计）人： | 张翼冠;赵海洋;魏平 | 申请（专利权）人： | 云测智能科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C40B50/06;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 成都瑞创华盛知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 51270 | 代理人： | 邓瑞;张敏 |
| 地址： | 610000 四川省成都市*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | 本发明提供一种采用少量简并引物全面扩增humanTCRβ链文库的制备方法，涉及免疫组库测序文库的扩增制备技术领域。淋巴细胞裂解和总RNA提取：步骤一、将样本预处理后，进行RNA提取；步骤二、逆转录：对获得的淋巴细胞的总RNA进行逆转录，获得cDNA；步骤三、多重PCR：通过对cDNA进行第一轮PCR和第二轮PCR，对cDNA的TCRβ链基因进行特异性扩增；步骤四、添加测序接头序列及index，构建文库较短，但包含完整的CDR3区段，可以获得更高的通量，更低的价格，每条特异性引物的添加量与扩增体系都是经过大量实验优化后确定的，本发明可以极大降低引物二聚体的数量，获得高质量文库。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 采用 少量 引物 全面 扩增 humantcr 文库 制备 方法 | ||
【主权项】：
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