[发明专利]一种CVB5病毒类病毒样颗粒的制备方法在审

专利信息
申请号: 202111385032.4 申请日: 2021-11-22
公开(公告)号: CN114107392A 公开(公告)日: 2022-03-01
发明(设计)人: 陈伟;张佳玉;滕培英;李金伟;杨帆;李静;郑莹 申请(专利权)人: 昆明理工大学
主分类号: C12N15/866 分类号: C12N15/866;C12N15/41;C12N15/66;C07K14/085;A61K39/125;A61P31/14
代理公司: 深圳市广诺专利代理事务所(普通合伙) 44611 代理人: 赵慧斌
地址: 650093 云南*** 国省代码: 云南;53
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摘要: 发明公开了一种CVB5病毒类病毒样颗粒的制备方法,具体包括以下步骤:步骤1,由CVB5基因组扩增获得P1与3CD基因片段,3CD基因5’端和3’端分别带有Xho I和Sph I酶切位点,将合成的带有酶切位点的基因酶切后连接到已经预先酶切的pFast‑Bac Dual载体的p10启动子下游,构建获得pFast‑BacDual‑3CD;步骤2,P1基因5’端和3’端分别带有Not I和Xba I酶切位点,将合成的带有酶切位点的基因酶切后连接到已经预先酶切的pFast‑Bac Dual‑3CD质粒,制备得到质粒pFast‑Bac Dual‑3CD‑P1;步骤3,利用构建融合CVB5的3CD和P1蛋白序列的穿梭表达载体转化到大肠杆菌DH10Bac感受态细胞中,获得阳性克隆,提取重组杆状病毒基因组DNA。本发明的CVB5的融合有外源肽段的3CD蛋白切割P1蛋白形成VLP,进而自组成大小均一的CVB5类病毒样颗粒。
搜索关键词: 一种 cvb5 病毒 类病毒 颗粒 制备 方法
【主权项】:
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