[发明专利]一种高表达猪PBMCs细胞因子的饲养层细胞构建方法在审
| 申请号： | 202111364146.0 | 申请日： | 2021-11-17 |
| 公开（公告）号： | CN114107395A | 公开（公告）日： | 2022-03-01 |
| 发明（设计）人： | 崔旻;王珂 | 申请（专利权）人： | 华中农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/867 | 分类号： | C12N15/867;C12N5/10 |
| 代理公司： | 武汉智嘉联合知识产权代理事务所(普通合伙) 42231 | 代理人： | 徐绍新 |
| 地址： | 430070 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 一种高表达猪PBMCs细胞因子的饲养层细胞构建方法，包括以下步骤：(1)从猪的外周血单个核细胞中克隆细胞因子，设计同源臂引物并连接慢病毒载体，构建含有细胞因子的重组质粒；(2)使用转染的方式，利用阳离子转染试剂，将构建的重组质粒同辅助质粒共转染包装慢病毒的细胞；(3)用包装的慢病毒感染饲养层细胞。本发明将猪IL‑2、IL‑4和IFN‑α基因插入到猪PK‑15细胞基因组内，构建能稳定表达并分泌细胞因子的饲养层细胞，替代猪外周血单个核细胞培养的添加物。所构建的饲养层细胞适合大规模培养，同时也极大地降低了培养成本，操作技术简单，适用性广泛，可广泛用于猪外周血单个核系和猪特定免疫细胞的培养。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 表达 pbmcs 细胞因子 饲养 细胞 构建 方法 | ||
【主权项】：
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