[发明专利]基于HEK293T克隆筛选的用于高滴度慢病毒生产的悬浮驯化方法在审
| 申请号: | 202111258035.1 | 申请日: | 2021-10-27 |
| 公开(公告)号: | CN113981007A | 公开(公告)日: | 2022-01-28 |
| 发明(设计)人: | 胡迪超;马红;隋礼丽;孔令洁 | 申请(专利权)人: | 苏州博腾生物制药有限公司 |
| 主分类号: | C12N15/867 | 分类号: | C12N15/867;C12N5/10;C12Q1/02 |
| 代理公司: | 苏州新知行知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 32414 | 代理人: | 郑丽玲 |
| 地址: | 215000 江苏省苏州市苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | 本发明公开了一种基于HEK293T克隆筛选的用于高滴度慢病毒生产的悬浮驯化方法,包括以下步骤:S1适合慢病毒包装的HEK293T贴壁细胞的克隆筛选,筛选出侵染效率较高的前若干个克隆细胞,进行扩大培养并建库,S2对筛选的HEK293T贴壁细胞进行快速悬浮驯化,得到细胞活率93~98%,且细胞分散性较好、无明显聚集的悬浮驯化成功的HEK293T细胞;S3悬浮HEK293T高滴度慢病毒包装克隆细胞的筛选,筛选侵染效率高的病毒上清,所对应的克隆细胞即为慢病毒高产的悬浮HEK293T细胞克隆。本发明提供的基于HEK293T克隆筛选的用于高滴度慢病毒生产的悬浮驯化方法,能快速获得生产高滴度慢病毒的悬浮HEK293T细胞克隆,所获得的悬浮HEK293T细胞克隆能无血清悬浮培养和病毒包装,病毒滴度高,纯化效率高,易于放大生产。 | ||
| 搜索关键词: | 基于 hek293t 克隆 筛选 用于 高滴度慢 病毒 生产 悬浮 驯化 方法 | ||
【主权项】:
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