[发明专利]筛选自噬降解辅助蛋白的方法在审
申请号: | 202111250596.7 | 申请日: | 2021-10-26 |
公开(公告)号: | CN114196706A | 公开(公告)日: | 2022-03-18 |
发明(设计)人: | 夏厚军;唐秋菊 | 申请(专利权)人: | 深圳先进技术研究院;中国科学院深圳理工大学(筹) |
主分类号: | C12N15/867 | 分类号: | C12N15/867;C12N5/10;C12N15/62;G01N33/68 |
代理公司: | 深圳五邻知识产权代理事务所(普通合伙) 44590 | 代理人: | 王策 |
地址: | 518055 广东省深圳市*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明采用慢病毒构建过表达GFP‑LC3及MHC‑I‑His蛋白的胰腺癌细胞,在抑制自噬降解的条件下通过磁力分选技术分离自噬小体,镍柱分选技术分离自噬体中的MHC‑I‑His蛋白结合复合物,经过胰蛋白酶水解后,使用Nano‑LC‑Q‑TOF‑MS对纯化的水解肽段进行质谱分析,最后通过查找数据库确定分离出的蛋白种类,从而实现MHC‑I自噬降解辅助蛋白的筛选。本发明可准确筛选出MHC‑I自噬降解的辅助蛋白,为阻断MHC‑I自噬降解,提高机体抗肿瘤免疫研究提供新的靶点。 | ||
搜索关键词: | 筛选 降解 辅助 蛋白 方法 | ||
【主权项】:
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