[发明专利]一种利用福尔马林固定石蜡包埋样本快速构建RRBS测序文库的方法有效
| 申请号: | 202111060933.6 | 申请日: | 2021-09-10 |
| 公开(公告)号: | CN113550013B | 公开(公告)日: | 2022-11-01 |
| 发明(设计)人: | 谷红仓;王云飞;车仙荣;陶宛琪;钱飞箭 | 申请(专利权)人: | 杭州圣庭医疗科技有限公司 |
| 主分类号: | C40B50/06 | 分类号: | C40B50/06 |
| 代理公司: | 杭州华鼎知识产权代理事务所(普通合伙) 33217 | 代理人: | 魏亮 |
| 地址: | 311113 浙江省杭州市余*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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| 摘要: | 本发明公开了一种利用福尔马林固定石蜡包埋样本快速构建RRBS测序文库的方法,属于分子生物学领域,本发明包括如下步骤:步骤一,取石蜡包埋的组织样本,获得基因组DNA;用末端修饰酶加ddATP修复;步骤二,采用限制性内切酶消化基因组DNA的CpG岛;步骤三,用末端修饰酶对基因组DNA进行末端修复并在3’端加A‑Tailing;步骤四,用DNA连接酶进行甲基化接头连接,混合样本;步骤五,采用亚硫酸氢盐转化非甲基化胞嘧啶;步骤六,甲基化文库PCR富集;步骤七,切胶回收;本发明解决了现有技术福尔马林浸泡造成的RRBS构建FFPE DNA文库失败率高的问题,具有广大的应用前景和市场价值。 | ||
| 搜索关键词: | 一种 利用 福尔马林 固定 石蜡 包埋 样本 快速 构建 rrbs 序文 方法 | ||
【主权项】:
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