[发明专利]一种小鼠卵巢颗粒细胞提取及培养方法在审

专利信息
申请号: 202110922898.8 申请日: 2021-08-12
公开(公告)号: CN113462637A 公开(公告)日: 2021-10-01
发明(设计)人: 陈玥;陈思;赵伟博;卢燕;王佩娟;叶宇齐 申请(专利权)人: 江苏省中医药研究院
主分类号: C12N5/071 分类号: C12N5/071
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 210028 江*** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 发明属于细胞生物学技术,具体涉及小鼠卵巢颗粒细胞提取及培养方法。技术方案的具体步骤:(1)向雌性小鼠腹腔注射孕马血清促性腺激素PMSG;(2)用颈椎脱臼法处死小鼠,分离小鼠卵巢,PBS清洗,显微镜下去除其周围脂肪被膜;(3)在混合操作液中用注射器针头刺破卵泡使颗粒细胞和卵母细胞释放出来,筛网过滤,滤液离心弃上清;(4)混合完全培养基重悬细胞沉淀接种,操作液为DME/F‑12 1:1(1X)+3%胎牛血清+2%青链霉素混合液+2%支原体清除剂。进一步,小鼠采用3周龄,体重10‑13g,未成熟的雌性小鼠,PMSG的注射量为5‑10IU,注射方法为腹腔注射,PMSG的注射量优选为8IU,断颈处死小鼠时间是在注射后46‑48h后。本发明提供的机械法操作简便,耗时短,而且获得的卵巢颗粒细胞得率高。
搜索关键词: 一种 小鼠 卵巢 颗粒 细胞 提取 培养 方法
【主权项】:
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