[发明专利]一种蛋白酶K高表达工程菌株的构建及应用在审
| 申请号： | 202110838854.7 | 申请日： | 2021-07-23 |
| 公开（公告）号： | CN113481225A | 公开（公告）日： | 2021-10-08 |
| 发明（设计）人： | 罗漫杰;徐灿;王梁;施婧妮;宫安;柯旭峰 | 申请（专利权）人： | 武汉瀚海新酶生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/57 | 分类号： | C12N15/57;C12N15/81;C12N1/19;C12R1/84 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 仇钰莹 |
| 地址： | 430223 湖北省武汉市东湖新技术开发区*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种蛋白酶K高表达工程菌株的构建及应用，属于基因工程及酶工程技术领域。本发明提供了一种新的编码蛋白酶K的基因，将该基因连接在pPICZαA表达载体上，构建蛋白酶K的单拷贝重组载体pPICZαA‑PRK，并基于同尾酶法，构建体外串联重复表达盒式结构多拷贝表达载体pPICZαA‑PRK‑nC；再通过酪蛋白透明圈法，筛选透明圈较大即潜在高表达量菌株，再通过摇瓶甲醇诱导表达筛选出表达量最高的菌株。相对于通过抗生素压力的筛选方法相比，本发明的构建方法和筛选方法不仅环保，而且能极大缩短筛选时间并节省人力成本。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 蛋白酶 表达 工程 菌株 构建 应用 | ||
【主权项】：
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