[发明专利]一种基于CRISPR-nCas3系统的高效基因组大片段删除方法及应用有效
| 申请号: | 202110639401.1 | 申请日: | 2021-06-08 |
| 公开(公告)号: | CN113528408B | 公开(公告)日: | 2022-03-01 |
| 发明(设计)人: | 彭文舫;郝怡乐 | 申请(专利权)人: | 湖北大学 |
| 主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12N15/74;C12N15/55;C12R1/01 |
| 代理公司: | 北京金智普华知识产权代理有限公司 11401 | 代理人: | 蓝晓玉 |
| 地址: | 430062 湖北省武汉市武*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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| 摘要: | 本发明属于生物技术领域,尤其涉及一种基于CRISPR‑nCas3系统的高效基因组大片段删除方法及应用。本发明首先利用生物信息学方法确定需要保留的必需基因及可以删除的非必需基因,选择一段长度为10Kb的非必须基因作为目标敲除大片段。然后在目标基因序列的编码链和模板链上各设计一个spacer序列,两个由spacer序列转录并加工出的crRNA搭配经过改造后的nCas3单链核酸内切酶共同作用,完成对目标DNA序列双链的破坏。最后将人工CRISPR簇和供体DNA序列组装到载体上,通过电穿孔转化到运动发酵单胞菌细胞内完成编辑。 | ||
| 搜索关键词: | 一种 基于 crispr ncas3 系统 高效 基因组 片段 删除 方法 应用 | ||
【主权项】:
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