[发明专利]一种微生物源双链RNA的快速制备方法在审

专利信息
申请号: 202110583398.6 申请日: 2021-05-27
公开(公告)号: CN113151335A 公开(公告)日: 2021-07-23
发明(设计)人: 莫芹;唐雪明;吕贝贝;孙宇;吴潇;宋丽莉 申请(专利权)人: 上海市农业科学院
主分类号: C12N15/70 分类号: C12N15/70;C12N15/113;A01N57/16;A01P7/04
代理公司: 上海开祺知识产权代理有限公司 31114 代理人: 张晓敏;费开逵
地址: 201106 *** 国省代码: 上海;31
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摘要: 一种微生物源双链RNA的快速制备方法,通过将靶标基因插入含有T7启动子的表达型载体,将含靶标基因的表达载体转化至RNase III缺陷型大肠杆菌HT115(DE3),获得表达菌株;将表达菌株加入含有氨苄青霉素和四环素的TB液体培养基中,摇床过夜培养,再转接菌液至TB培养基,摇床培养后加入IPTG诱导剂,诱导17‑22h后结束发酵;将重组菌细胞悬浮于高盐浓度的TE缓冲液中,破碎细胞经过60‑80℃加热40‑60min后,离心获得dsRNA生物制剂。本发明提高了dsRNA的合成效率,降低生产成本,dsRNA的最终产量能达到17.90±4.20μg/mL。
搜索关键词: 一种 微生物 源双链 rna 快速 制备 方法
【主权项】:
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