[发明专利]一种膜蛋白的纯化方法有效
| 申请号： | 202110580012.6 | 申请日： | 2021-05-26 |
| 公开（公告）号： | CN113278048B | 公开（公告）日： | 2023-03-10 |
| 发明（设计）人： | 王静;易汪雪 | 申请（专利权）人： | 武汉华美生物工程有限公司 |
| 主分类号： | C07K1/36 | 分类号： | C07K1/36;C07K1/30;C07K1/22 |
| 代理公司： | 武汉智嘉联合知识产权代理事务所(普通合伙) 42231 | 代理人： | 丁倩 |
| 地址： | 430000 湖北省武汉市东湖开发区高新*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种膜蛋白的纯化方法，包括：诱导目的膜蛋白在宿主细胞中表达；破碎宿主细胞，490g～1000g低速离心后取上清，将上清于30000g高速离心后取沉淀；用缓冲液重悬上述沉淀，然后加入去垢剂，震荡溶解后离心，取上清；采用亲和层析纯化，使用包含缓冲液、无机盐、十二烷基‑β‑D‑麦芽糖苷、咪唑和甘油的洗脱液进行洗脱，洗脱液超滤离心后即得目的膜蛋白。本发明针对现有的膜蛋白纯化方法存在去垢剂导致膜蛋白变性，目标膜蛋白提取率低，操作复杂，成本高昂等技术问题，将低速离心和高速离心结合，并对去垢剂进行选择，有效提高了总蛋白中目的膜蛋白的含量，即本发明提供了一种操作简单、成本低廉、提取率高且适用性广泛的膜蛋白纯化方法。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 膜蛋白 纯化 方法 | ||
【主权项】：
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