[发明专利]新型实用的毕赤酵母分泌性表达载体、构建方法及试剂盒在审
申请号: | 202110435391.X | 申请日: | 2021-04-22 |
公开(公告)号: | CN113122565A | 公开(公告)日: | 2021-07-16 |
发明(设计)人: | 饶犇;周荣华;刘晓艳;闵勇;廖先清;黄大野;朱镭;陈伟;石丽桥 | 申请(专利权)人: | 湖北省生物农药工程研究中心 |
主分类号: | C12N15/81 | 分类号: | C12N15/81;C12N15/66;C12N15/65;C12P21/00 |
代理公司: | 重庆纵义天泽知识产权代理事务所(普通合伙) 50272 | 代理人: | 舒梦来 |
地址: | 430064 湖北省武汉市武昌区*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明属于基因工程技术领域,公开了一种新型实用的毕赤酵母分泌性表达载体、构建方法及试剂盒,载体骨架来源于pPICZaA,最终载体骨架仅为4K左右,便于后续的分子克隆操作实验效率。原核中筛选抗性为卡那霉素,不同于pPICZaA载体的博来霉素抗性,博来霉素价格昂贵而且在转化筛选过程中经常出现生长不均一的菌落,俗称大小斑,给克隆筛选工作带来非常大的难度。载体选用经验证能显著提高蛋白发酵表达量的突变型AOX启动子,特别是大规模发酵中能显著提高蛋白表达量。本发明的载体选用MF4I信号肽,能高效分泌表达目的蛋白,让后续分离纯化工作简单快捷,进一步节省纯化费用。 | ||
搜索关键词: | 新型 实用 酵母 分泌 表达 载体 构建 方法 试剂盒 | ||
【主权项】:
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