[发明专利]一种稳定敲除abhd16a基因的HEK293细胞系及其构建方法在审
| 申请号： | 202110433097.5 | 申请日： | 2021-04-22 |
| 公开（公告）号： | CN113088497A | 公开（公告）日： | 2021-07-09 |
| 发明（设计）人： | 许君;徐朝;李小玲;邢国珍;薛继初;郑文明 | 申请（专利权）人： | 河南农业大学 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;C12N15/85;C12N15/55;C12R1/91 |
| 代理公司： | 北京棘龙知识产权代理有限公司 11740 | 代理人： | 谢静 |
| 地址： | 450002 河*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种稳定敲除abhd16a基因的HEK293细胞系及其构建方法，设计靶向abhd16a基因在第三个外显子的sgRNA序列，并构建pHMG‑sgRNA‑sgabhd16a敲除表达载体；将含有靶向abhd16a基因的sgRNA表达载体通过脂质体转染至HEK293细胞，通过CTAB法提取细胞基因组扩增含有靶向sgRNA序列上下游片段，测序检测是否有基因编辑；通过嘌呤霉素筛选后，利用有限稀释法获得除abhd16a基因敲除细胞细胞株，通过免疫印迹法检测敲除细胞株中abhd16a基因敲除后蛋白表达水平。本发明通过CRISPR/Cas9构建HEK293‑ABHD16A‑/‑细胞系，为进一步研究ABHD16A功能和作用机制提供有效的工具。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 稳定 abhd16a 基因 hek293 细胞系 及其 构建 方法 | ||
【主权项】：
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