[发明专利]一种高效生产2′-岩藻糖基乳糖的大肠杆菌工程菌株有效
| 申请号: | 202110389910.3 | 申请日: | 2021-04-12 |
| 公开(公告)号: | CN113186142B | 公开(公告)日: | 2023-01-31 |
| 发明(设计)人: | 沐万孟;张文立;万李;朱莺莺 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
| 主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12N15/70;C12P19/00;C12R1/19 |
| 代理公司: | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人: | 仇钰莹 |
| 地址: | 214000 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | 本发明提供了一种高效生产2′‑岩藻糖基乳糖的大肠杆菌工程菌株,属于合成生物学和微生物代谢工程技术领域。本发明以甘油为碳源,乳糖和L‑岩藻糖为底物,通过引入自组装短肽介导通路关键酶Fkp和FutC组装结合成酶复合物,从而减少代谢中间产物的流失提高产物生产效率,提高产物2′‑FL生产产量和产率。此外,还通过CRISPR/Cas9基因编辑系统敲除大肠杆菌中与底物降解以及中间产物分流相关的一系列基因,同时加强代谢通路中的辅因子的循环再生进一步提高2′‑FL的产量。使得到的大肠杆菌工程菌株在3L发酵罐条件下分批补料64小时可积累30.5g/L的2′‑FL,摩尔产率为0.661mol2′‑FL/mol岩藻糖和0.495mol2′‑FL/mol乳糖。对于工业化生产2′‑FL具有重要意义。 | ||
| 搜索关键词: | 一种 高效 生产 岩藻糖基 乳糖 大肠杆菌 工程 菌株 | ||
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