[发明专利]一种能稳定表达ABEmax蛋白的细胞株及其制备方法与应用有效
| 申请号： | 202110356842.0 | 申请日： | 2021-04-01 |
| 公开（公告）号： | CN113025652B | 公开（公告）日： | 2022-07-08 |
| 发明（设计）人： | 马旭;张璐;金孝华;曹小芳 | 申请（专利权）人： | 国家卫生健康委科学技术研究所 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N5/10;C12N15/55 |
| 代理公司： | 北京迎硕知识产权代理事务所(普通合伙) 11512 | 代理人： | 钱扬保;张群峰 |
| 地址： | 100081 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种能稳定表达腺嘌呤碱基编辑器(ABEmax)蛋白的细胞株及其制备方法和应用，该方法利用Piggybac系统导入ABEmax蛋白表达基因和抗生素筛选基因到工具细胞293T细胞中，通过抗性筛选到流式筛选阳性单克隆细胞株，最终得到能够稳定表达ABEmax蛋白的细胞株。本发明构建的细胞株是基于Piggybac转座子构成的载体‑辅助质粒系统、同源重组原理构建的。构建的293T工具细胞系含有嘌呤抗性，后续编辑过程中guide RNA需要设计连接到荧光质粒或其他非嘌呤霉素抗性质粒中便于筛选实验。本发明获得的这种工具细胞极大的简化了碱基编辑过程中细胞转染过程，为碱基编辑的推广应用奠定基础。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 稳定 表达 abemax 蛋白 细胞株 及其 制备 方法 应用 | ||
【主权项】：
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