[发明专利]一种DNA克隆方法有效
| 申请号： | 202110122275.2 | 申请日： | 2021-01-28 |
| 公开（公告）号： | CN112877324B | 公开（公告）日： | 2022-11-15 |
| 发明（设计）人： | 朱晓静;钟良军;戴忠敏;羊雪芹;贺瑞 | 申请（专利权）人： | 杭州师范大学 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人： | 沈金龙 |
| 地址： | 311121 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种DNA克隆方法，通过设计一对引物，引物的一端与载体配对，另一端与目的基因片段配对；当把目的基因片段、线性化的载体及引物混合后，在外切核酸酶的作用下，载体片段和目的基因片段5’端的碱基被逐渐切掉，露出3’突出的单链区，此时，引物能与单链区互补配对，并互为引物和模板，在DNA聚合酶的作用下延伸，使载体和目的基因片段具有重叠区，延伸产物又在外切核酸酶作用下，使重叠区被切成单链，这时目的基因片段和载体片段的单链区能够通过互补配对退火，在DNA聚合酶作用下延伸，最后在连接酶作用下连接成环状DNA。不必依赖PCR扩增目的基因，减少了PCR引起的突变；可以从DNA混合物中特异性地克隆目的片段；不留酶切位点的痕迹。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 dna 克隆 方法 | ||
【主权项】：
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