[发明专利]重组DpnI限制性内切酶的制备方法有效
| 申请号： | 202110021206.2 | 申请日： | 2021-01-08 |
| 公开（公告）号： | CN112813088B | 公开（公告）日： | 2023-06-27 |
| 发明（设计）人： | 于博文;李建辉;单永超 | 申请（专利权）人： | 上海咏科生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N9/22;C12N15/62;C12R1/19 |
| 代理公司： | 上海宛林专利代理事务所(普通合伙) 31361 | 代理人： | 张明 |
| 地址： | 201100 上海市闵*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种重组DpnI限制性内切酶的制备方法，包括以下步骤：步骤一、合成DpnI的编码基因，构建至原核表达载体，获得重组载体：DpnI的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，经添加终止密码子和密码子优化得到DpnI的编码基因的核苷酸序列；步骤二、将重组载体转入甲基化酶缺失的大肠杆菌感受态细胞中，获得重组菌；步骤三、将通过PCR及测序鉴定重组菌中的目的片段的序列正确性；步骤四、将带有正确目的片段的单克隆进行DpnI限制性内切酶表达；步骤五、DpnI限制性内切酶的纯化。相较于之前文献的特殊菌种的DE3溶源化表达方法，本发明方法所用菌株材料无需特殊处理，操作流程简化，成功率高。 | ||
| 搜索关键词： | 重组 dpni 限制性 内切酶 制备 方法 | ||
【主权项】：
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