[发明专利]Keratin 5-IRES-eGFP敲入的hESCs细胞系的构建及诱导分化方法有效
| 申请号： | 202011493656.3 | 申请日： | 2020-12-16 |
| 公开（公告）号： | CN112746074B | 公开（公告）日： | 2022-12-02 |
| 发明（设计）人： | 刘军;钟亚丹;荣知立;杨斌 | 申请（专利权）人： | 南方医科大学皮肤病医院（广东省皮肤病医院;广东省皮肤性病防治中心;中国麻风防治研究中心） |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/85;C12N15/65;C12N5/10;C12N15/90;C12N5/071 |
| 代理公司： | 广州凯东知识产权代理有限公司 44259 | 代理人： | 姚迎新 |
| 地址： | 510000*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了Keratin 5‑IRES‑eGFP敲入的hESCs细胞系的构建及诱导分化方法。具体方法为：构建sgRNA质粒，根据sgRNA切割位点构建打靶Doner载体，将cas9质粒，sgRNA质粒，打靶Doner载体共电转至hESCs细胞，得到初步阳性单克隆细胞系后电转表达cre酶的质粒，通过PCR跑胶和测序得到最终Keratin 5‑IRES‑eGFP敲入的hESCs细胞系。诱导分化hESCs细胞为角质形成细胞从而得到Keratin 5阳性的基底层角质形成细胞。该细胞系的建立有利于筛选出Keratin 5阳性的基底层角质形成细胞，从而为临床上表皮基底角质形成细胞异常的皮肤病研究提供细胞模型。 | ||
| 搜索关键词： | keratin ires egfp hescs 细胞系 构建 诱导 分化 方法 | ||
【主权项】：
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