[发明专利]一种对酸敏感转座子插入突变体的反向筛选方法有效

专利信息
申请号: 202010951090.8 申请日: 2020-09-11
公开(公告)号: CN112080546B 公开(公告)日: 2022-04-08
发明(设计)人: 季学猛;王硕 申请(专利权)人: 南开大学
主分类号: C12Q1/18 分类号: C12Q1/18;C12N15/10;C12R1/01
代理公司: 天津合正知识产权代理有限公司 12229 代理人: 邢月;张艳梅
地址: 300071*** 国省代码: 天津;12
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摘要: 发明提供了一种对酸敏感转座子插入突变体的反向筛选方法,包括如下步骤:(1)转座子插入突变体库的构建;(2)杀菌型抗生素和酸联合处理;(3)细菌培养与单克隆挑取;(4)细菌耐酸表型验证。本发明所述的对酸敏感转座子插入突变体的反向筛选方法依赖于酸性环境对杀菌型抗生素的拮抗作用,这些抗生素能特异性地杀死复制活跃细菌,而对环境胁迫下生长受抑制的细菌的杀菌效果较弱。测试结果表明,获得的突变体对酸敏感率高达100%,方法简单有效,在革兰氏阴性代表菌阪崎肠杆菌和革兰氏阳性代表菌单核增生李斯特菌都得到了成功应用,为基因功能的研究提供新工具和新方法。
搜索关键词: 一种 敏感 座子 插入 突变体 反向 筛选 方法
【主权项】:
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