[发明专利]一种流感病毒基因组末端检测方法及其应用

摘要

本发明公开了一种流感病毒基因组末端检测方法，包括如下步骤：1)提取流感病毒基因组，经反转录、环化反应得到环化的cDNA；2)对步骤1)所得环化cDNA进行巢式反向PCR扩增，得到含有各个病毒基因片段3’和5’末端序列的PCR产物；3)将步骤2)所得PCR产物克隆进入载体后，挑取至少2个克隆进行测序并分析测序结果，通过流感病毒基因组各基因片段高度保守的3’末端非编码区序列和5’末端非编码区序列的定位，即可获得准确的5’和3’末端非编码区及其临近编码区内的核苷酸序列。采用本发明的检测方法，可简便、快速的完成流感病毒基因组各个片段的3’和5’末端序列扩增和检测，从而显著地提高B型流感病毒的拯救效率，推动B型流感疫苗的开发。