[发明专利]一种利用糖蜜及羽毛水解粉高密度发酵合成谷胱甘肽的方法在审
| 申请号： | 201911272457.7 | 申请日： | 2019-12-12 |
| 公开（公告）号： | CN110746484A | 公开（公告）日： | 2020-02-04 |
| 发明（设计）人： | 蔡俊 | 申请（专利权）人： | 湖北工业大学 |
| 主分类号： | C07K5/037 | 分类号： | C07K5/037;C12P21/02;C12P21/06;C12R1/865 |
| 代理公司： | 42220 武汉帅丞知识产权代理有限公司 | 代理人： | 朱必武;周瑾 |
| 地址： | 430068 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种利用糖蜜高密度发酵合成谷胱甘肽的方法，该方法以酿酒酵母为发酵菌种，以糖蜜为碳源、羽毛水解粉等为氮源，在发酵过程采用多级变速流加碳源、氮源和磷源的方法进行发酵，并在规定的时间内恒速流加一定配比的谷氨酸、半胱氨酸、甘氨酸，不添加ATP，发酵34‑36小时，酵母细胞干重达到50‑90g/L，谷胱甘肽产量高达10000‑16000mg/L，实现谷胱甘肽的高密度培养。 | ||
| 搜索关键词： | 谷胱甘肽 氮源 糖蜜 发酵 谷氨酸 合成谷胱甘肽 高密度发酵 高密度培养 半胱氨酸 多级变速 发酵过程 发酵菌种 恒速流加 酵母细胞 酿酒酵母 甘氨酸 干重 磷源 流加 配比 水解 羽毛 | ||
【主权项】：
1.一种利用糖蜜及羽毛水解粉高密度发酵合成谷胱甘肽的方法，其特征在于：该方法包括如下步骤：/n（1）酿酒酵母接种于试管斜面上活化，30℃培养40-48h，然后将活化后的酿酒酵母接入液体种子培养基中，28-32℃，180-200rpm振荡培养20-24h，得到高活性酵母细胞；/n（2）糖蜜进行预处理，过滤分离，取滤液加入体积质量浓度0.001-0.005%的硫化钠，充分搅拌30-50分钟，静置1-2小时，再过滤分离，取滤液先加入果胶酶50℃反应1-2小时，然后再加入木瓜蛋白酶反应2-3小时，稀释至含糖量为26%～28%，最后用酸调节pH至5.0～6.0，混合均匀，备用；/n所述果胶酶的用量为：每升滤液中加入10-30U的果胶酶；/n所述木瓜蛋白酶的用量为：每升滤液中加入25-55U的木瓜蛋白酶；/n所述果胶酶、木瓜蛋白酶的酶活分别为4000U/g、 2000U/g；/n（3）羽毛水解粉的制备：用剪刀将羽毛剪成小段，加入羽毛质量2倍的水，在120-150℃下处理1-3小时，再加入羽毛质量2倍的水，待温度降至40-60℃后，按1Kg羽毛加入1000-1500U的角蛋白酶，在50-55℃、pH5.5-6.5条件下酶解2-3小时，升温至90-100℃维持30-50分钟，得到羽毛水解液，水解液喷雾干燥后即为羽毛水解粉；/n（4）将步骤（1）的活性酵母细胞接种于发酵罐中发酵， 28～32℃，发酵23～36h，当生物量湿重达到150-170g/L时开始流加谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸，控制流加速度在4-6小时内流加完毕，且整个发酵过程多级变速流加碳源、氮源、磷源，发酵过程中发酵液中酒精的含量控制在0.1%～0.3%；/n所述流加碳源为糖蜜、葡萄糖；/n所述流加氮源为羽毛水解粉、硫酸铵；/n所述流加磷源为磷酸二氢铵。/n
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