[发明专利]全长启动子质粒PGL3-TREM-1的构建方法、其调控方法及其转录因子的筛选方法有效
| 申请号： | 201911085329.1 | 申请日： | 2019-11-08 |
| 公开（公告）号： | CN110699372B | 公开（公告）日： | 2023-01-13 |
| 发明（设计）人： | 段练;高文曦;朱丹丹;沈培;张天宇;段义农 | 申请（专利权）人： | 南通大学 |
| 主分类号： | C12N15/66 | 分类号： | C12N15/66;C12N15/85 |
| 代理公司： | 北京科家知识产权代理事务所(普通合伙) 11427 | 代理人： | 徐思波 |
| 地址： | 226019 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明提供全长启动子质粒PGL3‑TREM‑1的构建方法，包括以下过程：收集小鼠肝脏组织，抽提小鼠肝脏组织的DNA，并以所抽取的DNA为模板及根据TREM‑1启动子特异性引物进行PCR，获得的PCR产物连接至PGL3‑Basic载体，连接产物转化至DH5α感受态细胞，获得的阳性克隆进行酶切、PCR及测序鉴定，对所构建的PGL3‑TREM‑1进行活性鉴定，PGL3‑TREM‑1构建成功。本发明还提供全长启动子质粒PGL3‑TREM‑1的调控方法，根据调控需求选择以后抑制方法或增强方法；本发明的实施例另外还提供全长启动子质粒PGL3‑TREM‑1的转录因子的筛选方法。 | ||
| 搜索关键词： | 全长 启动子 质粒 pgl3 trem 构建 方法 调控 及其 转录 因子 筛选 | ||
【主权项】：
1.全长启动子质粒PGL3-TREM-1的构建方法，其特征在于，包括以下过程：收集小鼠肝脏组织，抽提小鼠肝脏组织的DNA，并以所抽取的DNA为模板及根据序列号：ENSMUSG00000042265 的序列所设计的TREM-1启动子特异性引物进行PCR，获得的PCR产物连接至PGL3-Basic载体，连接产物转化至DH5α感受态细胞，获得的阳性克隆进行酶切、PCR及测序鉴定，对所构建的PGL3-TREM-1进行活性鉴定，PGL3-TREM-1构建成功。/n
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