[发明专利]全长启动子质粒PGL3-TREM-1的构建方法、其调控方法及其转录因子的筛选方法有效
| 申请号： | 201911085329.1 | 申请日： | 2019-11-08 |
| 公开（公告）号： | CN110699372B | 公开（公告）日： | 2023-01-13 |
| 发明（设计）人： | 段练;高文曦;朱丹丹;沈培;张天宇;段义农 | 申请（专利权）人： | 南通大学 |
| 主分类号： | C12N15/66 | 分类号： | C12N15/66;C12N15/85 |
| 代理公司： | 北京科家知识产权代理事务所(普通合伙) 11427 | 代理人： | 徐思波 |
| 地址： | 226019 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 全长 启动子 质粒 pgl3 trem 构建 方法 调控 及其 转录 因子 筛选 | ||
【权利要求书】：
1.一种构建的全长启动子质粒PGL3-TREM-1的调控方法，其特征在于，所述全长启动子质粒PGL3-TREM-1的构建方法如下所示，收集小鼠肝脏组织，抽提小鼠肝脏组织的DNA，并以所抽取的DNA为模板及根据序列号：ENSMUSG00000042265 的序列所设计的TREM-1启动子特异性引物进行PCR，获得的PCR产物连接至PGL3-Basic载体，连接产物转化至DH5α感受态细胞，获得的阳性克隆进行酶切、PCR及测序鉴定，对所构建的PGL3-TREM-1进行活性鉴定，PGL3-TREM-1构建成功；
根据调控需求选择抑制方法或增强方法，具体包括，a. 抑制方法：将PGL3-TREM-1质粒转染至RAW264.7细胞，并经rSjP40处理，荧光素酶活性检测试剂盒检测PGL3-TREM-1启动子活性，PGL3-TREM-1启动子活性降低；b. 增强方法：将PGL3-TREM-1质粒转染至RAW264.7细胞，经作为作为阳参的LPS刺激后，荧光素酶活性检测试剂盒检测PGL3-TREM-1启动子活性，PGL3-TREM-1启动子活性增强。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于南通大学，未经南通大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201911085329.1/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
