[发明专利]一种脂肪源干细胞提取制备方法在审
| 申请号: | 201911082200.5 | 申请日: | 2019-11-07 |
| 公开(公告)号: | CN110628713A | 公开(公告)日: | 2019-12-31 |
| 发明(设计)人: | 张鹏成 | 申请(专利权)人: | 安徽科门生物科技有限公司 |
| 主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775 |
| 代理公司: | 11357 北京同辉知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人: | 王依 |
| 地址: | 230000 安徽省合肥市高新区潜水*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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| 摘要: | 本发明公开一种脂肪源干细胞提取制备方法,其制备用液包括:I型胶原酶、EDTA、PBS和生理盐水。制备流程包括:取样、剪碎、消毒冲洗、酶解、分离、孵育、检测和定向培养。本发明在提取培养前使用PBS冲洗,并用生理盐水浸泡,消除了脂肪组织表面所附着的细菌,避免了在培养过程中细菌污染脂肪组织造成培养错误的问题;在温度为37℃的环境下培育细胞,模仿人体的温度环境,使得培育出的细胞能适应人体环境。 | ||
| 搜索关键词: | 制备 生理盐水 脂肪组织 脂肪源干细胞 细胞 定向培养 人体环境 温度环境 细菌污染 孵育 附着 剪碎 酶解 取样 冲洗 培育 浸泡 细菌 模仿 消毒 并用 检测 | ||
【主权项】:
1.一种脂肪源干细胞提取制备方法,制备流程包括:取样、剪碎、消毒冲洗、酶解、分离、孵育、检测和定向培养,其特征在于,具体提取制备方法如下:/nS1、取样:用无菌针管从臀上方吸取深层脂肪组织;/nS2、剪碎:将吸取到的深层脂肪组织剪碎;/nS3、消毒冲洗:将深层脂肪组织碎块用PBS冲洗,用酒精棉擦拭干净,再用生理盐水浸泡;/nS4、酶解:向消毒冲洗后的深层脂肪组织碎块中加入I型胶原酶和EDTA的混合液,并在37℃水浴中充分振荡;/nS5、分离:向酶解后的深层脂肪组织碎块中加入适量PBS混合过滤后,再低速离心;/nS6、孵育:在温度为37℃、含有CO
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