[发明专利]一种高效获得转基因萝卜的方法在审
| 申请号： | 201911077540.9 | 申请日： | 2019-11-06 |
| 公开（公告）号： | CN110656127A | 公开（公告）日： | 2020-01-07 |
| 发明（设计）人： | 杨峰;雍晓平;李晓梅;冉茂林;冉科 | 申请（专利权）人： | 四川省农业科学院水稻高粱研究所 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;A01H5/00;A01H6/20 |
| 代理公司： | 11754 北京鱼爪知识产权代理有限公司 | 代理人： | 曹治丽 |
| 地址： | 618000 四*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种高效获得转基因萝卜的方法。该方法包括以下步骤：(1)制备浸花材料；(2)构建并纯化pCAMBIA3301‑eGFP载体质粒；(3)农杆菌制备；(4)浸染；(5)收种。本发明使获得萝卜转基因植株的操作更加简便，不用再通过复杂且不稳定的萝卜再生体系，减少了花费在萝卜组织培养上的时间和金钱，降低了实验成本30％以上；同时，将萝卜遗传转化效率从传统方法的不足0.2％，增加到约1％，提高了近5倍。 | ||
| 搜索关键词： | 萝卜 制备 遗传转化效率 转基因萝卜 转基因植株 实验成本 载体质粒 再生体系 组织培养 农杆菌 构建 浸染 收种 | ||
【主权项】：
1.一种高效获得转基因萝卜的方法，其特征在于，包括以下步骤：/n(1)制备浸花材料/n将出芽5～6天后的萝卜培养40～50天后，拔出萝卜，去除其茎尖生长点以上的叶片，再于4～8℃中保存20～30天，筛选出未受病害的萝卜，栽种于3000～5000lx光照条件下，培育至抽薹开花，并去除已开花花朵后，备用；/n(2)构建并纯化pCAMBIA3301-eGFP载体质粒；/n(3)制备农杆菌/n将纯化后的pCAMBIA3301-eGFP载体质粒转化至感受态细胞中，进行菌落鉴定后，于-80～-60℃保存；/n(4)浸染/n将步骤(1)保存的萝卜植株取出，待其上的花朵开花后，置于浸染液中浸染1～5min，并对花朵进行套袋，遮光培育5～7天后，再次对花朵浸染1～5min，重复3～5次；/n(5)收种/n在步骤(4)浸染结束30～40天后，待种子成熟后采收即可。/n
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