[发明专利]基于衍生化净化与反萃取富集技术分析鲜烟叶中烟碱异构体的方法

摘要

本发明公开了一种基于衍生化净化与反萃取富集技术分析鲜烟叶中烟碱异构体的方法，包括：烟碱异构体利用碱性二氯甲烷提取；(1S)‑(‑)‑莰烷酰氯衍生化净化去除降烟碱、新烟草碱与假木贼碱的干扰；盐酸溶液反萃取富集；将富集得到的烟碱异构体利用商业化的常规全多孔多糖衍生物AMP色谱柱与反相液相色谱‑紫外检测器体系进行定性与定量的分析检测。本发明与其它手性分析方法相比，具有简单快速、重复性好(RSD＜2％)、分离度(Rs≥1.60)与灵敏度高(R‑烟碱占比最低检测限0.01％)的优点，能高效的分析鲜烟叶中的烟碱异构体组成。

主权项

1.一种基于衍生化净化与反萃取富集技术分析鲜烟叶中烟碱异构体的方法，其特征在于，包括以下步骤：/nS1 烟叶样品的预处理：先将采集的鲜烟叶样品进行速冻处理，然后采用冷冻干燥法干燥，干燥后将其研磨成粉末，得烟叶样品粉末备用；/nS2、鲜烟叶样品中烟碱异构体的提取：将内标溶液和质量分数5％氢氧化钠溶液加入到样品粉末中，涡旋混匀，再加入二氯甲烷涡旋提取，离心分层，取下层清液过滤得提取液备用；/nS3 烟碱异构体色谱干扰峰的衍生化净化：向提取液中加入衍生化试剂和碱性催化剂，涡旋反应，离心，取下层清液，得净化液备用；/nS4、烟碱异构体反萃取富集：向净化液中加入反萃取溶剂，涡旋混匀，离心，取上层清液，得烟碱异构体溶液备用；/nS5、液相色谱进样分离：在烟碱异构体溶液中加入氨水，采用液相色谱法进样分析检测，分离S-烟碱异构体和R-烟碱异构体；/nS6、鲜烟叶样品中烟碱异构体组成的定性及定量分析：用S-烟碱异构体、R-烟碱异构体与外消旋体R/S-烟碱相应的保留时间进行定性，内标法进行定量，采用紫外检测器分析检测。/n