[发明专利]固相萃取-高效液相色谱串联质谱法同时测定地表水中多种抗生素的方法

摘要

本发明提供一种固相萃取‑高效液相色谱串联质谱法同时测定地表水中多种抗生素的方法，水样经HLB固相萃取柱富集净化，通过对比不同水样PH和金属络合剂Na₂EDTA加入量等条件下目标分析物的回收率确定了最佳前处理方法。采用Agilent Zorbax Rrhd Eclipse Plus C18(2.1×50mm，1.8μm)色谱柱，正离子模式下采用0.2％甲酸‑2mmol乙酸铵水溶液和甲醇‑乙腈(v/v，1:1)体系作为流动相，负离子模式采用纯水和甲醇‑乙腈(v/v，1:1)体系作为流动相，梯度洗脱进行色谱分离，在HPLC‑MS/MS多重反应监测模式下分析，内标法定量。应用该方法对贵阳市南明河地表水水样进行检测，共检出34种抗生素，检出总浓度在47.2ng/L～1740ng/L，其中大环内酯类检出浓度最高，平均浓度为257ng/L。

主权项

1.一种固相萃取-高效液相色谱串联质谱法同时测定地表水中多种抗生素的方法，其特征在于，包括以下步骤：/n1)液相条件：选取Agilent Zorbax Rrhd Eclipse Plus C18色谱柱，所述色谱柱的规格为2.1×50mm，1.8μm；设置所述色谱柱的进样量为5μL；流速0.2mL/min；柱温40℃；/n其中，氯霉素类化合物在负离子模式下进行分析检测，流动相A为超纯水，流动相B为体积比1:1的甲醇：乙腈，流动相梯度为0-2min，25-60％B；2-4min，60-80％B；4-5min，100％B，保持2min，7-7.01，100—25％B，7.01-9min，25％B；/n其他化合物均在正离子模式下分析检测，无机相为0.2％甲酸水含2mmoL乙酸铵，流动相梯度为：0-0.5min，5％B；0.5-5min，5-20％B；5-10min，20-40％B，10-14min，40-70％B，14-17min，70-100％B，保持3min，20-20.01min，100-5％B，20.01-23min，5％B。/n2)质谱条件：ESI+/ESI-切换；多重反应监测模式(MRM)，载气温度：325℃，载气流速6L/min，锥口电压45psi，鞘气温度370℃，鞘气流速12L/min，毛细管电压3500V；/n3)样品前处理方法/n水样静置，取上清液，经0.45μm微孔滤膜过滤除去悬浮颗粒物，准确量取500mL水样调pH值至5，加入20ng内标指示物摇匀，准确加入0.25g Na₂EDTA，然后用规格为6cc/500mg的Oasis HLB小柱进行富集净化，HLB柱先依次用5mL甲醇和5mL超纯水进行活化，上样流速控制在2.0-5.0mL/min左右；上样后先用10mL超纯水清洗HLB小柱，并抽干，然后用6mL体积比为5:95的氨水：甲醇溶液作为洗脱液进行洗脱；洗脱液在35℃用N₂吹干浓缩至近干，最后用1:9甲醇水定容至0.5mL，12000r/min离心10min后取上层清液上机分析，内标法定量。/n