[发明专利]犬瘟热病毒CDV-3株感染性cDNA克隆及其构建方法和应用有效
申请号: | 201910985048.5 | 申请日: | 2019-10-16 |
公开(公告)号: | CN110951778B | 公开(公告)日: | 2021-08-03 |
发明(设计)人: | 薛向红;闫喜军;卜研;陈杰;赵建军;赵传芳;胡博 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院特产研究所 |
主分类号: | C12N15/85 | 分类号: | C12N15/85;C12N15/45;C12N7/01 |
代理公司: | 北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司 11139 | 代理人: | 马鑫 |
地址: | 130112 吉林省长*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: |
本发明公开了犬瘟热病毒CDV‑3株感染性cDNA克隆及其构建方法和应用。本发明以犬瘟热病毒CDV‑3株为模板,将CDV‑3的全长分5个片段进行RT‑PCR扩增。经酶切拼接,将5个片段顺次插入到真核载体,同时在F1首端和F5末端分别加入锤头状核酶和丁型肝炎核酶序列,获得犬瘟热病毒CDV‑3株感染性cDNA克隆。然后,构建表达CDV‑3N、P、L蛋白的三个辅助质粒。将犬瘟热病毒CDV‑3株感染性cDNA克隆和三个辅助质粒共转染293T细胞,获得拯救后的重组CDV‑3病毒(rCDV‑3)。研究发现,获得的rCDV‑3病毒滴度最高达到10 |
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搜索关键词: | 犬瘟热 病毒 cdv 感染性 cdna 克隆 及其 构建 方法 应用 | ||
【主权项】:
暂无信息
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