[发明专利]酸浆类块根体诱导发生的方法及类块根体介导的遗传转化方法有效
| 申请号： | 201910896821.0 | 申请日： | 2019-09-19 |
| 公开（公告）号： | CN110710451B | 公开（公告）日： | 2022-04-08 |
| 发明（设计）人： | 徐克东;李成伟;张菊;李晓丽;常云霞;于德水;张怡 | 申请（专利权）人： | 周口师范学院 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00;C12N15/82 |
| 代理公司： | 北京法信智言知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11737 | 代理人： | 刘静荣 |
| 地址： | 466001 河*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | 本发明属于生物技术与组织培养领域，具体涉及酸浆类块根体诱导发生的方法及类块根体介导的遗传转化方法。本发明的诱导酸浆类块根体发生的方法包括酸浆无菌苗的培养；类根体诱导培养基(RHI‑M)诱导酸浆的叶片产生类根体；RTB诱导培养基(RTB‑M)诱导类根体产生RTB结构；将诱导出的RTB结构转至分化培养基(RTBR‑M)诱导胚体萌发成丛生芽；将丛生芽转至生根培养基等步骤。本发明可快速、高效诱导酸浆RTB结构，并且可以酸浆叶片为转化外植体通过RTB介导的方法成功转化外源基因；所诱导出的RTB结构可离体成苗，成苗率100％。 | ||
| 搜索关键词： | 酸浆类 块根 诱导 发生 方法 体介导 遗传 转化 | ||
【主权项】：
1.酸浆类块根体诱导发生的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：/n(1)培养酸浆无菌苗；/n(2)选取酸浆无菌苗的叶片为外植体，置于类根体诱导培养基上，于暗条件下诱导产生类根体结构，其中，类根体诱导培养基包括以下成分：1/2MS盐、MS有机、5.0mg/L NAA、3.6g/L结冷胶，类根体诱导培养基的pH为5.8；/n(3)将诱导出的类根体转移至RTB诱导培养基中，于光下诱导类块根体结构，其中，RTB诱导培养基包括以下成分：MS盐、MS有机、10.0mg/L TDZ、3.6g/L结冷胶，RTB诱导培养基的pH为5.8；/n(4)将切离的类块根体结构，置于RTB胚体再分化培养基中，诱导胚体的萌发，其中，RTB胚体再分化培养基包括以下组分：MS盐、MS有机、2.5mg/L BAP、7.8g/L琼脂粉，RTB胚体再分化培养基的pH为5.8；/n(5)将萌发的胚体转移至生根培养基上，诱导生根，其中，生根培养基包括以下组分：1/2MS盐、1/2MS有机、0.05mg/L NAA、10g/L蔗糖、7.8g/L琼脂粉，生根培养基的pH为5.8；/n(6)炼苗、驯化、移栽。/n
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