[发明专利]酸浆类块根体诱导发生的方法及类块根体介导的遗传转化方法有效
| 申请号： | 201910896821.0 | 申请日： | 2019-09-19 |
| 公开（公告）号： | CN110710451B | 公开（公告）日： | 2022-04-08 |
| 发明（设计）人： | 徐克东;李成伟;张菊;李晓丽;常云霞;于德水;张怡 | 申请（专利权）人： | 周口师范学院 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00;C12N15/82 |
| 代理公司： | 北京法信智言知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11737 | 代理人： | 刘静荣 |
| 地址： | 466001 河*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 酸浆类 块根 诱导 发生 方法 体介导 遗传 转化 | ||
1.酸浆类块根体诱导发生的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
(1)培养酸浆无菌苗，选择健康饱满的酸浆种子，消毒后，播于无菌苗培养基，于25℃，16h光照/8h黑暗，光照度为150μmol.m-2s-1的组织培养条件下培养酸浆无菌苗，其中，无菌苗培养基的配方为：MS盐、MS有机、30g/L蔗糖、7.8g/L琼脂粉，无菌苗培养基的pH为5.8；
(2)选取酸浆无菌苗的叶片为外植体，置于类根体诱导培养基上，于暗条件下诱导产生类根体结构，其中，类根体诱导培养基的配方为：1/2MS盐、MS有机、5.0mg/L NAA、3.6g/L结冷胶，类根体诱导培养基的pH为5.8；
(3)将诱导出的类根体转移至RTB诱导培养基中，于光下诱导类块根体结构，培养条件为25℃，16h光照/8h黑暗，光照度为120μmol.m-2s-1，其中，RTB诱导培养基的配方为：MS盐、MS有机、10.0mg/L TDZ、3.6g/L结冷胶，RTB诱导培养基的pH为5.8；
(4)将切离的类块根体结构，置于RTB胚体再分化培养基中，诱导胚体的萌发，培养条件为25℃，16h光照/8h黑暗，光照度为120μmol.m-2s-1，其中，RTB胚体再分化培养基的配方为：MS盐、MS有机、2.5mg/L BAP、7.8g/L琼脂粉，RTB胚体再分化培养基的pH为5.8；
(5)将萌发的胚体转移至生根培养基上，诱导生根，培养条件为25℃，16h光照/8h黑暗，光照度为120μmol.m-2s-1，其中，生根培养基的配方为：1/2MS盐、1/2MS有机、0.05mg/L NAA、10g/L蔗糖、7.8g/L琼脂粉，生根培养基的pH为5.8；
(6)炼苗、驯化、移栽。
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