[发明专利]一种山慈菇人工快繁的新方法

摘要

本发明公开了一种山慈菇人工快繁的新方法，包括以下步骤：(1)获取外植体；(2)将步骤1的假鳞茎先用自来水清洗表面泥土，再用洗衣粉溶液浸泡后流水冲洗，接着用乙醇溶液处理，再经消毒后冲洗；(3)获取无菌苗；(4)取步骤3中培养由芽点生长出来的幼芽转接入步骤3中的A培养基内进行增殖培养，将携带有愈伤组织的幼苗切下，继续转入B培养基中进行培养；(5)把步骤4中继代培养后具米粒大小假鳞茎的单苗接种于C培养基中进行培养；(6)炼苗和移栽。本发明对山慈姑离体快速繁殖进行了优化调整，简化了人工快繁过程，大大提高了繁殖效率，成本低、时间短，不仅提高了试管苗炼苗的成活率，且大大缩短了育苗周期。

主权项

1.一种山慈菇人工快繁的新方法，其特征在于，包括以下步骤：/n(1)外植体的获取：选择表型性状优良的山慈菇植株，取其假鳞茎作为外植体；/n(2)将步骤1的假鳞茎先用自来水清洗表面泥土，再用洗衣粉溶液浸泡并震荡搅动后流水冲洗，置于工作台；接着用维生素C溶液浸泡，再接着用乙醇溶液处理，再经汞水溶液消毒，最后冲洗，得到消毒灭菌好的假鳞茎；/n(3)无菌苗的获取：将经过步骤2消毒灭菌好的假鳞茎按芽点用手术刀切割茎段，放入A培养基中进行培养；/n所述A培养基，包括以下组分：/n1/2MS基本培养液/n香蕉泥/n萘乙酸NAA/n6-苄胺基嘌呤6-BA/n活性炭AC/n蔗糖/n琼脂粉；/n(4)取步骤3中培养由芽点生长出来的幼芽转接入步骤3中的A培养基内进行增殖培养，同时在步骤3中发现外植体基部会产生愈伤组织，将携带有愈伤组织的幼苗切下，继续转入B培养基中进行培养；/n所述B培养基，包括以下组分：/n1/2MS基本培养液/n香蕉泥/n萘乙酸NAA/n6-苄胺基嘌呤6-BA/n激动素KT/n活性炭AC/n蔗糖/n琼脂粉；/n控制光照度、温度、光照时间的条件下进行培养，同步进行愈伤组织诱导，丛芽发生和增殖；接着观察发现愈伤组织开始增殖，待愈伤组织的表面出现紫色芽点，愈伤组织迅速分化出不定芽，不定芽开始分化出幼苗，并且有不定根的发生；接着将愈伤组织转接至相同的B培养基中继续增殖分化，而将获得的幼苗转入相同B培养基中继续培养，试管苗基部均有米粒大假鳞茎出现；/n(5)把步骤4中继代培养后具米粒大小假鳞茎的单苗接种于C培养基中进行培养；/n所述C培养基，包括以下组分：/n1/2MS基本培养液/n香蕉泥/n萘乙酸NAA/n活性炭AC/n蔗糖/n琼脂粉；/n控制光照度、温度、光照时间的条件下进行培养至形成完整的根系；/n(6)炼苗和移栽：取步骤5中的生根植株置于室温下炼苗，从C培养基中取出幼苗，将残留C培养基清洗干净，放入多菌灵溶液中消毒后移栽至消毒后的基质中保温保湿培养，得移栽苗。/n