[发明专利]一种血浆中儿茶酚胺代谢物高效液相色谱串联质谱检测方法

摘要

本发明提供了一种血浆中儿茶酚胺代谢物高效液相色谱串联质谱检测方法，包括样品制备、样品处理、样品检测及结果分析步骤，标准品及质控品采用在牛血清白蛋白中加入儿茶酚胺代谢物标准品进行制备，采用弱阳离子交换96孔板进行样品固相萃取，处理样品，处理后的样品进行高效液相色谱质谱检测，本发明检测方法具有灵敏度高、特异性高，受基质影响程度低，单个样本检测时间短，样本用量少，检测成本低等优点。

主权项

1.一种血浆中儿茶酚胺代谢物高效液相色谱串联质谱检测方法，其特征在于，包括如下步骤：/n(1)样品制备：/n标准品制备：以牛血清白蛋白作为空白基质，加入儿茶酚胺代谢物标准溶液，配制系列已知浓度的儿茶酚胺代谢物标准品；/n质控品制备：以牛血清白蛋白作为空白基质，加入儿茶酚胺代谢物标准溶液，配制低、中、高三个已知浓度的儿茶酚胺代谢物质控样品；/n(2)样品处理：样品包括待测人血浆样品、标准品、质控品，处理方法均如下：/nA)预处理：取500μL样品，加入15μL内标液，涡旋混匀，再加入50mM乙酸铵溶液500μL，涡旋混匀；/nB)固相萃取处理：将步骤A)中预处理样品转移入经过活化平衡的弱阳离子交换96孔板中，静置5分钟后，加入平衡淋洗液1mL，负压或正压至干；再加入1mL甲醇，负压或正压至干；最后分2次分别加入250mL洗脱液，在负压或正压下收集到96孔收集板中，用氮气吹干；/nC)样品复溶：将100μL复溶液加入到步骤B)经氮气吹干后的96孔收集板中，加覆96孔板封膜，涡旋至少5分钟使残渣充分溶解，在4000rpm下离心5min后待测；/n(3)样品检测：取步骤(2)处理后得到的样品10～40μL，自动进样，进行高效液相色谱串联质谱检测；/n(4)数据处理及分析：建立标准曲线并计算待测人血浆样品儿茶酚胺代谢物浓度。/n