[发明专利]人乳头瘤病毒和热休克蛋白重组蛋白的制备方法有效
| 申请号： | 201910704904.5 | 申请日： | 2019-07-31 |
| 公开（公告）号： | CN110423280B | 公开（公告）日： | 2021-02-02 |
| 发明（设计）人： | 孙昌荣;李利华;李慎涛;王志 | 申请（专利权）人： | 北京泓恩生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C07K19/00 | 分类号： | C07K19/00;C12N15/62;C12N15/70;C12N1/21;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 黄爽 |
| 地址： | 100044 北京市石景*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明提供一种人乳头瘤病毒和热休克蛋白重组蛋白的制备方法，包括：A、构建表达人乳头瘤病毒和热休克蛋白重组蛋白的工程菌；B、诱导表达及目的蛋白纯化；其中，所述工程菌是将重组蛋白的编码基因经密码子优化后构建到pET28a质粒上，转入大肠杆菌得到的。利用本发明提供的人乳头瘤病毒和热休克蛋白重组蛋白的优化基因能够获得高效表达，目的蛋白的表达水平占全菌蛋白的20％。在蛋白纯化过程中，包涵体采用十二烷基肌氨酸钠溶解，结合柱上复性，有效避免了工艺复杂，减少了变性剂尿素或盐酸胍的使用，减少了废液排放，本方法具有成本低、复性率高以及操作方便等诸多优点，为人乳头瘤病毒和热休克蛋白重组蛋白的制备提供了新思路。 | ||
| 搜索关键词： | 乳头 病毒 休克 蛋白 重组 制备 方法 | ||
【主权项】：
1.人乳头瘤病毒和热休克蛋白重组蛋白的制备方法，其特征在于，所述方法包括：A、表达人乳头瘤病毒和热休克蛋白重组蛋白的工程菌的构建；B、诱导表达及目的蛋白纯化；其中，所述工程菌是将人乳头瘤病毒和热休克蛋白重组蛋白的编码基因经密码子优化后构建到pET28a质粒上，转入大肠杆菌得到的；其中，所述人乳头瘤病毒和热休克蛋白重组蛋白为：(a)SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列；(b)SEQ ID NO:2所示序列经取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且具有同等功能的由(a)衍生的蛋白质。
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