[发明专利]一种通过敲除rfaD基因高效合成PHB的方法有效
| 申请号: | 201910701822.5 | 申请日: | 2019-07-31 |
| 公开(公告)号: | CN110373435B | 公开(公告)日: | 2021-02-26 |
| 发明(设计)人: | 王小元;王建莉;马文渐;李烨 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
| 主分类号: | C12P7/62 | 分类号: | C12P7/62;C12N15/70;C12R1/19 |
| 代理公司: | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人: | 张勇 |
| 地址: | 214000 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | 本发明公开了一种通过敲除rfaD基因高效合成PHB的方法,属于基因工程和发酵工程领域。本发明敲除大肠杆菌基因组上rfaD基因后将合成PHB的酶的编码基因转化到菌株中发酵生产PHB。发现rfaD基因的敲除可以显著改善大肠杆菌W3110、DH5α和JM109合成PHB的能力,WJW00/pDXW‑8‑phaCAB的PHB体积产量较对照菌W3110/pDXW‑8‑phaCAB提高3.95和3.66倍;WJD00/pDXW‑8‑phaCAB细胞合成PHB占细胞干重比例较对照菌提高约80%,转化率提高约1.9倍;WJJ00/pDXW‑8‑phaCAB细胞合成PHB占细胞干重比例较对照菌提高约75%,转化率提高约1.8倍。 | ||
| 搜索关键词: | 一种 通过 rfad 基因 高效 合成 phb 方法 | ||
【主权项】:
1.一种高效合成聚3‑羟基丁酸酯(PHB)的方法,其特征在于,敲除大肠杆菌基因组上ADP‑L‑甘油‑D‑甘露‑庚糖‑6‑差向异构酶RfaD基因(又名GmhD),并将β‑酮基硫解酶,乙酰辅酶A还原酶和PHB合成酶的编码基因转化到菌株中得到重组菌后,利用重组菌进行发酵生产。
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