[发明专利]狂犬病毒灭活抗原的定量检测方法有效
申请号: | 201910570508.8 | 申请日: | 2019-06-27 |
公开(公告)号: | CN110274982B | 公开(公告)日: | 2021-09-14 |
发明(设计)人: | 宋芳;肖进;张蕾;董春娜;齐鹏;栗利芳;刘新月;巴利民;侯旭;李玲;李静;张文亮;李鹏宇 | 申请(专利权)人: | 中牧实业股份有限公司 |
主分类号: | G01N30/88 | 分类号: | G01N30/88 |
代理公司: | 北京惟诚致远知识产权代理事务所(普通合伙) 11536 | 代理人: | 王慧凤;李巍 |
地址: | 100070 北京市丰台*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明公开了一种狂犬病毒灭活抗原的定量检测方法。该方法,包括:首先用SDS‑PAGE法和TEM法对目标峰定性鉴定;然后用蛋白定量试剂盒测定标准品的浓度;将此标准品进行系列稀释,用凝胶色谱柱在色谱仪上检测标准品在280nm处的吸收峰,建立浓度和峰面积的线性回归方程;根据线性回归方程和待测样品的峰面积计算得到待测样品中的狂犬病毒灭活抗原浓度。本发明的方法可用于狂犬病毒生产的质量控制,具有快速、稳定、重复性好的优点,可指导疫苗的生产,对提高疫苗品质起到重要作用。 | ||
搜索关键词: | 狂犬病毒 抗原 定量 检测 方法 | ||
【主权项】:
1.狂犬病毒灭活抗原的定量检测方法,用于对待测样品中的狂犬病毒灭活抗原进行定量检测,其特征在于:包括下述步骤:(1)对目标峰进行定性鉴定(2)待测样品进行离心澄清;(3)用蛋白定量试剂盒测定标准品中抗原浓度;(4)取标准品进行系列稀释,用高效液相色谱(HPLC)法进行检测,建立以峰面积为横坐标、浓度为纵坐标的线性回归方程;(5)对待测样品用步骤(4)所述的高效液相色谱(HPLC)法进行检测得到对应的峰面积;(6)根据线性回归方程及样品中狂犬抗原的峰面积计算得到待测样品中的狂犬病毒灭活抗原浓度;其中,(4)、(5)中所使用的高效液相色谱法使用的色谱柱为凝胶色谱柱,检测器为紫外检测器,其检测波长为280nm。
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