[发明专利]肾移植供体特异性尿源细胞及其DNA的制备方法以及其应用在审
| 申请号： | 201910558698.1 | 申请日： | 2019-06-26 |
| 公开（公告）号： | CN110305835A | 公开（公告）日： | 2019-10-08 |
| 发明（设计）人： | 王长希;刘龙山;李希芮;韦勇成;苏晓均 | 申请（专利权）人： | 中山大学附属第一医院 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071;C12N15/10;C12Q1/6869 |
| 代理公司： | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人： | 程跃华 |
| 地址： | 510080 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明涉及肾移植供体特异性尿源细胞及其DNA的制备方法以及其在肾移植供体基因组学背景分析中的应用。本发明尿源细胞的制备方法包括以下步骤：(1)取肾移植受体的中段尿，离心，弃上清；(2)向离心所得下层沉淀中加入含有青链霉素混合液或原代细胞抗生素的磷酸盐缓冲液进行重悬，然后再次离心，弃上清；(3)向离心所得下层沉淀中加入尿源细胞培养基，重悬，得到细胞悬液；(4)将所得细胞悬液接种于培养容器中，进行细胞体外扩增，得到肾移植供体特异性尿源细胞。本发明基于肾移植术后受体尿液获取的供体特异性尿源细胞，获得供体DNA，进行供体基因组学背景分析，其安全无创、成本低廉且分离效率高，易于获得足够数量的DNA。 | ||
| 搜索关键词： | 尿源 肾移植 供体特异性 细胞 制备 供体基因组 背景分析 重悬 下层 沉淀 磷酸盐缓冲液 细胞悬液接种 细胞培养基 分离效率 培养容器 青链霉素 肾移植术 细胞悬液 原代细胞 供体DNA 混合液 中段尿 尿液 外扩 无创 抗生素 应用 安全 | ||
【主权项】：
1.一种肾移植供体特异性尿源细胞的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)取肾移植受体的中段尿，离心，弃上清；(2)向步骤(1)离心所得下层沉淀中加入含有青链霉素混合液或原代细胞抗生素的磷酸盐缓冲液进行重悬，然后再次离心，弃上清；(3)向步骤(2)离心所得下层沉淀中加入尿源细胞培养基，重悬，得到细胞悬液；(4)将步骤(3)所得细胞悬液接种于培养容器中，进行细胞体外扩增，得到肾移植供体特异性尿源细胞。
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