[发明专利]一种基于ESR技术检测蛋白中UVA-核黄素体系对多酚氧化的方法有效

专利信息
申请号: 201910500846.4 申请日: 2019-06-11
公开(公告)号: CN110220933B 公开(公告)日: 2022-08-26
发明(设计)人: 启航;贺宝玉;时逸馨;张英乔;孙一含;申平;蒋迪;董秀萍;姜鹏飞 申请(专利权)人: 大连工业大学
主分类号: G01N24/10 分类号: G01N24/10;G01N1/28
代理公司: 大连格智知识产权代理有限公司 21238 代理人: 刘琦
地址: 116034 辽宁省大*** 国省代码: 辽宁;21
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摘要: 发明公开了一种基于ESR技术检测蛋白中UVA‑核黄素体系对多酚的氧化的方法,包括以下步骤:取含有核黄素和多酚的蛋白溶液,加入自由基捕获剂a‑(4‑吡啶基‑1‑氧)‑N‑叔丁基硝基酮,自由基捕获剂终浓度为20~60mM;S2、将步骤S1所得混合溶液进行UVA照射;S3、用毛细管吸取UVA照射后的溶液,进行电子自旋共振检测;本发明应用ESR检测蛋白中UVA‑核黄素体系对多酚的氧化后自由基信号的生成,为蛋白氧化过程中产生的自由基信号的检测提供更快速、准确的方法及明确的规范。
搜索关键词: 一种 基于 esr 技术 检测 蛋白 uva 核黄素 体系 氧化 方法
【主权项】:
1.一种基于ESR技术检测蛋白中UVA‑核黄素体系对多酚氧化的方法,其特征在于,包括步骤:S1、取含有核黄素和多酚的蛋白溶液,加入自由基捕获剂POBN,得混合溶液A;所述混合溶液A中,POBN浓度为20~60mM;所述自由基捕获剂POBN为a‑(4‑吡啶基‑1‑氧)‑N‑叔丁基硝基酮;S2、将步骤S1所述混合溶液A进行UVA照射,得混合溶液B;S3、用毛细管吸取步骤S2所述混合溶液B,进行电子自旋共振检测;所述电子自旋共振检测的扫描条件为:中心磁场:3460~3490G;扫描宽度:50~100G;频率:9.75GHz;衰减器:10.00~30.00dB;功率:9.50~10.50mW;接收增益:1.00×105~1.00×106;调制频率:100kHz;调制幅度:1.00G;相位调变:0.00deg;偏移量:0.00%;时间常数:3000.00msec~8000.00msec;转换时间:300.00~400.00msec。
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