[发明专利]稳定表达CD163受体蛋白的重组质粒、重组慢病毒和猪肺泡巨噬细胞系及其构建方法在审
申请号: | 201910478145.5 | 申请日: | 2019-06-03 |
公开(公告)号: | CN110195080A | 公开(公告)日: | 2019-09-03 |
发明(设计)人: | 彭军;徐煜琳;庞恒;李传刚;王亭亭;吴家强 | 申请(专利权)人: | 山东农业大学 |
主分类号: | C12N15/867 | 分类号: | C12N15/867;C12N15/66;C12N5/10;C12N15/12 |
代理公司: | 北京盛凡智荣知识产权代理有限公司 11616 | 代理人: | 叶培辉 |
地址: | 271018 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明提供了一种稳定表达CD163受体蛋白的重组质粒、重组慢病毒和猪肺泡巨噬细胞系及其构建方法,属于生物技术领域。该重组质粒是以慢病毒表达载体pLV‑sfGFP[2A]Puro为基础构建的,并整合有CD163编码基因。本发明提供的这种稳定表达CD163受体蛋白的重组质粒、重组慢病毒和猪肺泡巨噬细胞系及其构建方法,采用特殊的慢病毒系统将CD163基因整合到永生化的PAM细胞染色体上,使得永生化的PAM细胞系能够永久性地稳定表达CD163蛋白,而使细胞易受PRRSV感染。PRRSV在该细胞系(mPAM‑CD163)上的毒价可以高达106.9TCID50/0.1mL,且能够稳定传代。 | ||
搜索关键词: | 稳定表达 重组质粒 巨噬细胞系 重组慢病毒 蛋白 肺泡 构建 永生化 慢病毒表达载体 传代 生物技术领域 细胞染色体 编码基因 基础构建 基因整合 慢病毒 毒价 整合 细胞 | ||
【主权项】:
1.一种用于CD163受体表达的重组质粒,其特征在于,所述重组质粒是以慢病毒表达载体pLV‑sfGFP[2A]Puro为基础构建的,并整合有CD‑163编码基因。
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