[发明专利]一种用于miRNA的高通量测序文库制备方法在审
| 申请号: | 201910457046.9 | 申请日: | 2019-05-29 |
| 公开(公告)号: | CN112011834A | 公开(公告)日: | 2020-12-01 |
| 发明(设计)人: | 李华;郭子文;谢跃华 | 申请(专利权)人: | 上海京房生物科技有限公司 |
| 主分类号: | C40B50/06 | 分类号: | C40B50/06;C40B40/06;C12Q1/6869 |
| 代理公司: | 江苏昆成律师事务所 32281 | 代理人: | 刘尚轲 |
| 地址: | 200000 上海市闵行*** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | 由于目前缺乏一种专门精确定量常规样品中miRNA的高通量测序文库制备方法,故本发明提出一种精确定量化的针对miRNA的高通量测序文库制备方法,其主要包括如下步骤:取一定量RNA样品与衔接子RA3混合进行连接反应,再与衔接子RA5进行连接反应,接着与特异性结合于衔接子RA3的反转录引物RT Primer混合,进行反转录反应,得到DNA第一链;然后与特异性结合于衔接子RA3相应区域的通用引物RNA primer1和特异性结合于衔接子RA5相应区域的特异引物RNA primer index混合,进行PCR反应,获得扩增产物;最后将扩增产物进行6%凝胶电泳,割取所需的目的DNA片段并回收,此即制备完成的测序文库,经长度范围检测和浓度定量之后即可用于Illunima高通量测序平台直接测序。 | ||
| 搜索关键词: | 一种 用于 mirna 通量 序文 制备 方法 | ||
【主权项】:
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